扫码下载《动物行为实验手册》pdf斑马鱼旷场实验(Open Field Test, OFT)是一种评估动物行为的常用方法,用于测量动物在新环境中的运动活动、探索行为和焦虑样行为。斑马鱼旷场实验是一种简单、快速且有效的行为学评估方法,可以为研究斑马鱼的行为提供重要信息。旷场实验可用于评估药物对斑马鱼行为的影响,如焦虑、运动活动和探索行为的改变,以及研究神经系统疾病模型。使用一个透明或者半透明的开阔空间,如水槽或水箱,确保测试环境安静、光照条件一致。将斑马鱼个体放入旷场实验的中心区域,让其自由探索。通常,斑马鱼会倾向于在边缘区域活动,避免中心开阔区域,这种行为称为“边缘偏好”(thigmotaxis)。成鱼旷场实验示意图实验步骤:旷场实验由正方形鱼缸组成,中央区域边长为整个旷场边长的一半。分别统计斑马鱼在中央区域与周围区域滞留时间,评估其焦虑情绪与探索意愿。旷场实验分别测量斑马鱼在中心区域与外周区域所花费的时间或高速运动、潜伏期等指标,评估斑马鱼的焦虑与探索行为。实验采用长与宽均为 40 cm,高度为 20 cm 的亚克力水槽,将水槽划分为中心与外周两个区域。中心区域为位于模具中心长宽均为 20 cm 的正方形区域,其他区域为外周区域。实验选择3-6个月发育良好的成年斑马鱼进行,每组分别选择15条雄鱼与15条雌鱼参与实验,实验时间均为每日 9:00-15:00。实验时每次将一条斑马鱼放入水槽正中心,使斑马鱼自由适应3分钟,3分钟后摄像头记录5分钟,并使用分析软件绘制斑马鱼游动轨迹。旷场用于研究斑马鱼进入开阔环境后的各种行为,在初入旷场时,由于动物对新开阔环境的恐惧而主要在周边区域活动,在中央区域活动较少,但动物的探究特性又促使其产生在中央区域活动的动机,因此,可在旷场中划分中央区域与周围区域,通过统计斑马鱼在中间与周围区域的滞留时间来评估其焦虑程度。成鱼旷场实验使用正方形旷场进行,与幼鱼类似,也通过划分中央区域与周围区域进行分析。斑马鱼幼鱼旷场实验分析:使用FishTrack视频跟踪系统记录斑马鱼的运动轨迹,分析其在旷场中的位置偏好、移动速度、移动距离和停留时间等行为参数。通过行为分析软件,如VisuTrack或FishTrack,自动分析斑马鱼的行为数据,包括在中心区域和边缘区域的时间分布、移动速度和总移动距离,实验通常持续10到30分钟。通过比较实验组和对照组的行为参数,可以评估不同处理对斑马鱼行为的影响。注意事项:实验前应让斑马鱼适应环境,减少因温度变化或光照变化引起的行为改变。实验过程中应避免任何可能引起斑马鱼紧张的干扰。参考文献:Ahmad F, Richardson MK. Exploratory behaviour in the open field test adapted for larval zebrafish: impact of environmental complexity. Behav Processes. 2013 Jan;92:88-98.王康.WAC基因缺失型突变对斑马鱼神经系统发育影响的研究[D].华中科技大学,2021.Stewart AM, Gaikwad S, Kyzar E, Kalueff AV. Understanding spatio-temporal strategies of adult zebrafish exploration in the open field test. Brain Res. 2012 Apr 27;1451:44-52.找实验方法,上脑声常谈斑马鱼行为实验交流群扫码邀请入群